hücreler sağlıklı olduklarında donmuş ve aktif bir yüzde 90 canlılığı ile büyüyen olmalıdır . Bakım kullanım ve yüksek hızda santrifüj alınmalıdır ve dinç pipetleme veya aspirasyon canlılığını korumak ve hücresel hasarı önlemek için kaçınılmalıdır .
Kriyoproteksiyon
kriyoproteksiyon ajandır hücre içi su için bir yedek olarak kullanılabilir . Ajan hücrelerde meydana gelen buz kristalleri ve su kaybını önler. Steril gliserol ve steril dimetilsülfoksit genellikle yüzde 15 hücre tipine bağlı olarak , fetal dana serumu ya da büyüme ortamı ya da içinde seyreltilmiş ( hacim başına hacim) yüzde 5 arasında bir konsantrasyonda kullanılmaktadır.
Donma noktasının ve dondurma karışımı içinde depolama
hücreler yavaşça soğutulmalıdır. Programlanabilir bir dondurucu mevcut değilse , cryovialsdondurma işlemi yavaş olabilir ki, doku sarılmış ya da plastik köpük yerleştirilebilir . Hücreler, 24 saat boyunca 80 santigrat derece eksi tutuldu ve daha sonra uzun süreli saklama için sıvı nitrojen transfer edilmelidir .
Defrost
Dondurulmuş hücreler hızlı bir şekilde çözdürülmelidir. 37 ° C'de bir su banyosu kullanılabilir. Sıvı azotşişeleri girebilir ve çözdürme patlayabilir Care gibi , ancak, sıvı azot içinde saklanır hücreleri ile alınmalıdır. Karışım dondurma büyüme ortamı içinde seyreltilmelidir. Hücre canlılığı normal kültürlü maviboya tripan vehücreleri ile değerlendirilmelidir .