PCR Ortak uygulamaları DNA parmak izi ( DNA fragmanları izole edildiği ve karşılaştırılmıştır karşı içerir mevcut veri ) , son derece küçük miktarlarda numune ( soyu tükenmiş organizmalar ve merhum tarihsel figürler yeniden bilim adamları sağlayan) ve viral DNA ve kanser araştırma dahil olmak üzere hastalık teşhisi ( ) analizi .
PCR Bileşenler
gerekli bileşenleri ve PCR reaksiyonunun reaktifleri şunlardır: genomik DNA ( çoğaltılması için şablon ); , iki primer (ileri ve bir geri )DNA şablon sekansına ücretsiz; ( Taq polimeraz ve reaksiyon meydana hangi uygun bir ortam sağlayan bir tampon çözeltisi de dahil olmak üzere ) bir reaksiyon kokteyl ; veTaq enzimi (bireysel iplikçikler "inşa " yardımcı olacak nükleotid ) içinsubstrat .
PCR
Steps
tepkimeninadımlar : Denatürasyon (sıcaklıkDNA şablonu iplikleri ayırmak için yükseltilir sırasında ); (Isı izole edilmiş DNA şablonu ipliklerini uymak için serbest bir primer dizileri teşvik etmek için soğutulur sırasında )primerin tavlama ; ve (Taq polimerazprimer yapışır ve her izole edilmiş DNA şablon iplikçiği çoğaltmak için serbest yüzen nükleotidler kullanır sırasında ) Uzantısı. Bu işlemi birkaç kez tekrarladıktan özgün DNA şablonundan Her çoğaltılmış dizisini izole edecektir . Yeterli bir miktarı, istenen deney için olana kadar her bir tekrarlama katlanarak çoğaltılan DNA miktarını artırır. Optimum sıcaklık ve diğer koşullar için , aşağıda , Kaynaklar Yale Üniversitesi'nin " Tasarımı PCR Programlar" bakınız . PCR
Aşamaları
reaksiyon ayrıca üç aşamada tarif edilebilir : (DNA katlanarak çoğaldığı sırasında ) büyütmesi; Seviye - Off (Taq polimeraz aktivitesini kaybeder sırasında ) ; ve Yayla ( bu süre sonunda başka bir ürünün mevcut reaksiyonda üretilebilir .) PCR reaksiyonu interaktif bir gösteri için, aşağıda Kaynakları Utah " PCR Virtual Lab " University bakın .