Yaygın olarak kullanılan aside dirençli bir boyama tekniği olan Ziehl-Neelsen boyama yöntemi aşağıdaki adımları içerir:
1. Balgam örneğinin hazırlanması:Hasta derin bir şekilde öksürür ve balgam örneği çıkarır. Bu numune daha sonra bir cam lam üzerine sürülür ve eşit dağılım sağlanır.
2. Isıyla sabitleme:Balgam yaymasının bulunduğu slayt, bakterilerin slayta yapışmasını arttırmak ve kalan canlı mikroorganizmaları öldürmek için ısıyla sabitlenir.
3. Boyama:Isıyla sabitlenen slayt, aside dirençli bakterilerin mumsu hücre duvarlarına nüfuz edebilen bazik bir boya içeren, genellikle karbolfuksin veya bazik fuksin gibi birincil bir boyayla doldurulur. Slayt, boyanın nüfuz etmesini kolaylaştırmak için yavaşça ısıtılır.
4. Asit-alkol yıkama:Slayt daha sonra bir asit-alkol çözeltisi ile durulanır; bu, birincil lekeyi koruyan aside dirençli basiller dışında çoğu bakterinin rengini giderir.
5. Karşıt boyama:Kontrast sağlamak ve aside dayanıklı olmayan bakterileri görünür kılmak için metilen mavisi gibi bir karşıt boyama uygulanır.
Bu adımlar tamamlandıktan sonra slayt, asit dirençli basillerin varlığını tespit etmek için yağa batırılarak mikroskop altında incelenir. AFB'nin gözlemlenmesi, potansiyel bir TB enfeksiyonuna işaret eder ve tanıyı doğrulamak ve uygun tedavi rejimini belirlemek için kültür ve moleküler analizler gibi ileri tanı testleri yapılır.
Bununla birlikte, balgam örneğinde AFB'nin varlığının tek başına TB'yi kesin olarak doğrulamadığını ve tüberkülozun doğru tanısı ve tedavisi için klinik bulgular, laboratuvar testleri ve tıbbi uzmanlığın bir kombinasyonunun gerekli olduğunu belirtmek önemlidir.