direkt ELISA testinde , bir birincil antikor bir mikrotitre plakasının duvarlarında tutulur. Antijeni ihtiva ettiğinden şüphelenilen numune eklenir, bir antijen-antikor reaksiyonu bulunmaktadır. Daha sonra, antijen ile reaksiyona girebilme yeteneğine sahip bir enzim -bağlı ikincil antikor ilave edilir. Antijennumune içerisinde mevcut olması halinde , bu enzime bağlı antikora bağlanır. Renksiz bir alt-tabaka eklendiğinde bir renk gelişmesi durumunda , bu antijenin varlığına işaret etmektedir. Dolaylı ELİSA olarak, antijen , mikrotitre plakasının duvarlarında tutulur. Antikor içerdiğinden şüphelenilen , bir örnek eklendiğinde, bir antijen -antikor reaksiyonu meydana gelir. Daha sonra, antikorun ilişkisiz bölgesi ile tepkimeye yeteneğine sahip bir enzim -bağlı ikincil antikor ilave edilir. Renksiz bir alt tabaka ilave edildiğinde kullanılan örnek antikorları içeriyorsa , bu rengin gelişmesine yol açmaktadır. Test
etiketli ikincil antikor geniş bir yelpazede ticari olarak içinde
kolaylığı kullanılabilir . Ayrıca, belirli bir tür içinde çeşitli primer antikorlar oluşturmak ve tespiti için aynı ikincil antikor kullanmak mümkündür . Bu gerçekleştirmek için dolaylı ELISA kolaylaştırır. Doğrudan ELISA , birincil antikorlar, numune içinde mevcut olduğu düşünülenözel bir antijen ile reaksiyona için özel hazırlanmış olması gerekir. Budolaylı teste kıyasladirekt ELISA dezavantajlı hale getirir .
Test
Rapidity
doğrudan ELISA testidolaylı testine göre hızlı o çünkü sadece tek bir antikor kullanılır. Dolaylı ELISA sonuçları elde etmek için bir gecikmeye neden olan test prosedürü sırasında, ikinci bir antikor ile inkübasyon için ek bir adım gerektirir.
Duyarlılık
direkt ELISA testi daha çok daha az sinyal amplifikasyonu olduğu için testin dolaylı bir biçimde daha hassas . Bunun yanı sıra, bir enzim ile , birincil antikoretiketleme ile immonoreactivity profil bozabilir. Dolaylı ELİSA durumunda, primer antikor etiketlenir değildir ve bu nedenle, kendi immünoreaktivite korur. Bunun yanı sıra, her bir birincil antikor , ikincil antikor ile bağlanan birçok epitopu vardır, bu yöntemin hassasiyetini geliştirmek , sinyalin genişlemesini sağlar . Bununla birlikte , sonuçların bir hata yol açan antijen ve ikincil antikor arasında çapraz reaktivitesinin bir şansı vardır. Doğrudan ELISA yöntemi böyle bir olasılık yoktur .