. Karıştırılarak 60 ° C'ye kadarbir çözüm ısıtın. 4 ° C'ye çözelti, bir pH ölçer yardımı ile pH'ı 9.5 'e ayarlayın soğutun. PH'ın ayarlanması için , istenen pH değerinin elde edilmesi için , buzlu asetik asit ilave
2P perfüzyon pompası kadar ayarlayın; . Tüm cam parçaları ve bir perfüzyon iğne takılır . Cam parçaları artıkları temizlemek için perfüzyon pompasının boru içinden musluk suyu 100 ml çalıştırın. Bir buz kutusuna sabitleştirici bir behere koyun .
3
perfüzyon tüpünucunu açın ve bir sabitleştirici beher yerleştirin . Hayvanın büyüklüğüne göre çözelti hacmini Scale . Şimdi yavaş , istikrarlı bir damla perfüzyon pompa valfini ayarlayın. Vanasını kapatın . Yüzde 0.9 ( ağırlık /hacim ) tuzlu su çözeltisi ileperfüzyon aparatı doldurun .
4.
çalışma masasının yakınındacerrahi aletleri yukarı ayarlayın. Vücut ağırlığının ( ketamin 0.5 mg /kg) göre olan bir hayvana anestezi enjeksiyon verin. Aşağı sırtıameliyat masasındahayvan yerleştirin.
5
diyaframınuzunluğu boyunca , bir neşter ile bir kesim olun . Büyük makas , aşağı kör tarafı ,diyaframınaltındakibağ dokuları kesmek . Kalp maruz . Forseps ileatan kalpte tutun vesol ventrikül içine bir iğne takın .
6
yüzde 0,9 tuz çözeltisiakışını sağlamak içinperfüzyon pompavalfini açın . Çözüm özgürce akan vehayvan hayatta olduğundan emin olun . Hayvanın kalbi atmaya sürekli olmalıdır. Kan tuzlu çözelti ile ikame edildiğinde, yüzde 4 paraformaldehit için çözüm olarak değiştirin.
7
perfüzyon durdurun ve ilgi konusu bir doku incelemek . 4 C.
aynı ortamda doku tutun