protokolü hazırlanması takip etmek kolaydır , ve 37 santigrat derece işlemek için yaklaşık 20 dakika sürer . Deneyde kullanılancanlı hücreler kullanıma hazırlamak için birkaç saat ile birkaç gün arasında sürebilir. Onlar apoptoz geçirmeye neden olması gerekir gibikontrol hücreleri , hazırlamak için birkaç saat sürebilir .
Protocol Bölüm 1
Kültür apoptosis için bir yoğunluk optimum için hücreleri veya oksidatif stres indüksiyon , özel indüksiyon protokole göre , ancak geçmeyecek 10 ( 6 ) hücre /ml .
aynı anda Protokol Bölüm 2
zaman , kültürkaynaklı nüfus olarakaynı yoğunlukta olmayan kaynaklı negatif kontrol hücre popülasyonu ( .
Protokol Bölüm 3
apoptosis veya bilerek aşağıdakimitokondri depolarize İstediğiniz protokol .
Protocol Bölüm 4
1X Tahlili /Wash Buffer hazırlayın .
protokol Parçaları 5-8
1 mM hazırlayın ya da 0.2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM hazır . Protokol için Bölüm 6 ,1 mM'lik bir 1:100 seyreltme ya da 0.2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM bir 1:20 seyreltme hazırlamak
hücre kültürü numuneleri içine spike için bir çözüm.
Protokol Bölüm 7 için, MitoPT ™ TMRE /TMRM solüsyonunun, nihai 20-200 nM konsantrasyonu kullanılarak leke hücreleri.
Protokol Bölüm 8 için, analiz veri .