hücre türlerinin çoğunluğu ( DMEM) ya da yüzde 10 fetal dana serumu,2 milimoles eklenmesiyle Roswell Park Memorial Institute (RPMI ) , Dulbecco değiştirilmiş Eagle ortamı içinde kültür edilebilir amino asit glutamin ve antibiyotikler , örneğin , 100 birim penisilin ve streptomisin mililitre başına 0.1 miligram . Hücreler, 37 derece Celsius ve 5 oranında karbon dioksit nemlendirilmiş bir kuluçka makinesi içinde kendi ortam içinde muhafaza edilmiştir .
Bölme
hücreler enfeksiyon , ölüm ya da büyüme için günlük olarak kontrol edilmelidir . Doku kültürü şişesi hücrelerinde kaplı yüzde 80 sonra, hücreler, hücrelerin sağlık ve büyümelog faz değiştirmemesi için gerekli bölünmelidir. Ortam çıkarılır ve hücreler, fosfat tamponlu tuzlu su içinde yıkanmaktadır. Yapışık hücreler, hücre yapışma proteinleri uzaklaştırmak için tripsin etilendiamintetraasetik asit (EDTA) eklenmesini gerektirir. Nazik ajitasyonhücreleri kaldırmanız gerekir . Ortam tripsin /EDTA solüsyonu nötralize etmek için ilave edilmesi gerekmektedir.
Besi yerinden
seyreltildi hücreleri ve tryspin /EDTA çözeltisi pelet için santrifüj edilebilir ve yıkama hücreler . Hücreler ortam içinde yeniden süspansiyon haline getirildi ve seyreltilmiş ve yeni şişelere replated olabilir . Hücreler bölünür her zaman hücreler pasaj sayısı bir artırılır.
Ortam değişim
Media eski medya çıkarılması ile değiştirilmesi ile haftada iki kez değiştirilmelidir yeni medya ısındı .