radyasyon hibrit eşleştirme , ilk memeli kromozomlarının uzun menzilli haritalar yapımında ve birbirine göre genetik işaretleyicilerin yerini keşfetmek için geliştirilmiş bir genetik mühendisliği süreçtir. Radyasyon hibrit haritalama deoksiribonükleik asit (DNA ) belirteçleri vekromozomlar üzerinde kendi düzeni arasındakimesafeleri ölçmek için bir istatistik modeli yatmaktadır . DNA belirteçleri çok kısadır . Siklik DNA dizileri, bir genom içinde yer alır. Radyasyon melez haritalama genomundaki genleri , insan hastalığı lokalize için vazgeçilmez olduğu kanıtlanmıştır . Bu DNA belirteçleriningöreli konumu genetik harita olarak bilinen bir fiziksel harita içine birleştirildi edilebilir. Radyasyon Hibrid Tekniği
Steps
radyasyon melezilk adım teknik amplifikasyonu ve dizileme projesi bir ilk adıma benzer DNA'nın saflaştırılmasını içerir. Radyasyon sonra küçük bölümler halindebölünmüş DNA için kullanılır ve bu parça daha sonra bir melez hücre içine dahil edilir. Radyasyon melez hücre daha sonra büyük miktarlarda yetiştirilmeye yetiştirilmektedir. Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve bağlantı analizi DNA belirteçler arasındaki mesafe çözmek için kullanılır. Kolayca çeşitli genetik belirteçlerinvarlığı için kontrol edebilirsiniz . Yakıniki genetik işaretleri birbirine ,azDNA yarma radyasyon ayrılacakolasılığıdır vardır .
Prosedür /Teknik
radyasyon hibrid teknik prosedür toksik ortam içinde hayatta kalma yeteneğine sahip olan iki farklı hücre çizgilerinin kullanımını içerir . Ancak, (nedeniyle, bir toksin dirençli enzim üretimine ) tek bir hücre içine birleştirildiğinde toksik ortamı dayanabilmektedir genleri içerir. İnceleme altındaki hücre çizgisiDNA sonları neden olan ( genelde X- ışınları ile ) ışınlanır. Bu, kromozom , bir melez üreten , daha sonra erimiş ya da diğer hücre çizgisi ile entegre birkaç parça halinde kırmak için neden olur. Melez iki hücre genleri dahil etti vegerekli enzim üretebilir yana,zehirli ortamda hayatta olacaktır .
Yetiştirme
yaşayabilirhibrid hücre şimdi büyük miktarlarda yetiştirilmektedir . Bu, ışınlanmış hücre hattından mirasDNA güçlendirir. Elde edilen Numune daha sonra belirli bir genetik işaretleyiciler iki amplifiye etmek için PCR işlemine tabi tutulur. Her iki belirteçler , elde edilen hücre kuşağı dahil edilmiştir ki , bir jeli üzerindePCR ürünleri kullanan olarak, bu kontrol edilebilir. DNA belirteçleri her klon ( ekili örnek ) korunur hangifrekansları istatistiksel yöntemler kullanılarak hesaplanabilir .
Uygulama
birden fazla türün için kromozomlarınoluşturulan haritalar insanlar gibi , sıçan , fare ve diğer genomları çok faktörlü hastalıklar eğitim için kullanılan son derece detaylı ve hassas haritalarınüretimi kolaylaştırmak . Diğer uygulamalar 26 insan yeni tam - uzunlukta cDNAs ( kromozomal DNA) kromozom yerlerinin belirlenmesini içermektedir .