Otoradyografi yapılırken, X-ışını filmleri bu naylon membranların yanına veya bunlarla yakın temas halinde yerleştirilir ve genellikle plastik ambalajla ayrı ayrı sarılır. Otoradyografi, X-ışını filmlerinin yanlarına kasetler (filmi zara yakın tutan kapalı ışık geçirmez taşıyıcılar) yerleştirerek zarlar üzerindeki radyoaktif olarak etiketlenmiş nükleik asitlerin tespit edilmesine ve görselleştirilmesine olanak tanır.
Radyoaktif malzeme bozunduğunda, X-ışını filmi üzerindeki gümüş halojenür kristalleriyle etkileşime giren fotonlar veya elektronlar biçiminde enerji açığa çıkarır. Bu, işlemden sonra X-ışını filmi üzerinde, membran üzerindeki radyo-etiketli nükleik asitlerin konumlarına karşılık gelen koyu lekelerin veya bantların oluşmasına yol açar.
Bu nedenle, X-ışını filmi doğrudan naylon membranın üstüne yerleştirilmez, membran üzerindeki nükleik asitlere hibritlenen radyoaktif probların yaydığı radyasyonu yakalamak için ayrı ayrı kullanılır.