Bağışıklık boyamasıyla imünolekelemeimmunodefense sürecine dahil olan proteinler olan antikorları tespit etmek için kullanılan bir tekniktir , Susan R. Haynes der " RNA - Protein Etkileşimi Protokolleri ". Bu, NBT kullanımı , hem de sığır serum albümini , birincil antikorlar, 9E10 , Comassia boyama çözeltisi , nitroselüloz membranlar , Tris baz tampon çözeltisi , amonyum başı sülfat , sodyum dodesil sülfat ve su ile doyurulmuş buthanol içerir.
BCIP /NBT Alkalin Fosfataz Substrat Çözeltisi
Uygulayıcılar 1 oranında 5-Bromo -4-kloro -3-indolil fosfat ( BCIP ) üç damla , 1,5 oranında üç damla sahip bir çözelti hazırlanmıştır NBT ,IHC Dünya sitesine göre , pH 9.5 ' de kimyasal madde Levamisole ve alkalin fosfataz ( AP ) tamponu , iki damla , . Çözelti daha sonra kullanmak için oda sıcaklığında ve uygun inkübe edilir . Galaktozidaz ve alkalin fosfataz Etkinlikler
Algılama Dokusunda
galaktosidazlar kırılabilir enzimlerdir Escherichia coli ve diğer organizmalarda mevcut galaktozid molekülü . Protokol Online göre, bu protokol sırasında , biyologlar PBS solüsyonu , glutaraldehit ve paraformaldyde ile tedavi edilen sıçan hücre örnekleri kullanın . Sonra, potasyum ferrosiyanür , magnezyum klorür, sodyum deoksikolat ve deterjan Nonidet P-40 ile ,numune için bromo -kloro -indolil- galaktopiranosid ya da X- gal reaksiyon tamponu hazırlayın. Teknisyenler daha hızlı bir alternatif olarak yerine potasyum ferrosiyanat nitro mavi tetrazolyum ( NBT ) kullanabilirsiniz . Hücre örnekleri daha sonra mikroskop altında görülmektedir .