LB Agar Plates yapmak nasıl

Agar kırmızı alg imal ve çeşitli amaçlar için kullanılan jelatinli bir maddedir . Onun yaygın kullanımlarından biri, bakteriler için bir kültür ortamında olduğu gibi. LB agar lizojeni suyu (LB) ile kombine edilmiştir besleyici agar olduğunu. Bu LB Luria - Bertani açılımı yaygın olarak yapılan yanlış. Baş harfleri her zaman lizojeni broth için değil, onun adını ve onun coresearcher o durmak amaçlanmıştır ki : " P1 , P2 , ve Diğer Deneysel Sistemleri Mid - Yirminci Yüzyılda at lizojeni " Ancak, mucit , Giuseppe Bertani , onun kağıt devletler , Salvador Luria . LB agar yönlü ve yapmak oldukça basittir . Things You 1 bitmiş ortamı L , satılık ihtiyacınız olacak :
Ölçek ve 1 - L dereceli silindir
ağırlığındaki kağıtlar veya tepsilerde
1 L distile veya deiyonize su
2 - L Erlenmeyer şişesi
10 g tirpytob
5 g maya özütü
5 g noniodized sofra tuzu
15 g Agar
Alüminyum folyo
Suya fırın eldivenleri
Otoklav veya düdüklü tencere
Steril Petri kapları
1 kullan iki kez hazırlamak niyetindeortamınhacmini tutan bir Erleni
Daha Talimatları göster
.

Erlenmeyer şişesi içineTripton , maya özü ve tuz koyun .
2 öde yakın ilgiotoklav veya düdüklü tencerebasınç sterilizasyon yaparken .

distile veya deiyonize su ve efendim Ekle veyakuru malzemeyi çoğu çözmek için sallayın .
3

agar ekleyin ve sallamak veya heyecan devam ediyor . Agar tüm çözülür olmaz , ama sen çözüm içine bunun çoğu almak önemlidir . Da şişenin alt yerleşme agar erimemiş büyük kümeleri kaçının.
4

folyo ile şişenin açıklığını Seal.
5

bir otoklav -inşişe yerleştirin güvenli konteyner .
6.

kabın içine su yaklaşık 1 cm dökün .
7.

otoklav içinekabı ve şişeyi koyun . Bir sıvı döngüsü için otoklav ayarlama ve en az 20 dakika süre ile sterilize edin. Eğer sterilizasyon için bir düdüklü tencere kullanıyorsanız , bir düdüklü tencere kullanıyorsanız ,tencereye su küçük bir miktar koyun
8

. Aksi takdirde , Adım 10 atlayın. 8. Adım gidin ve suda şişe yerleştirin. Bu yöntemi kullanarak bir anda 250'den fazla mL sterilize etmeye çalışmayın .
9

yaklaşık 20 psibasınç tencereyi getir ve yaklaşık 30 dakika boyunca sterilize .
10 < p >şişe oldukça sıcak olacak gibi bakımı ,otoklav veya düdüklü tenceredenşişeyi çıkarın . sterilizasyon tamamlandıktan sonra
11 yavaşçaşişeyi çalkalayın

. Bu çözüm boyunca daha eşitagar dağıtacak.
12 uygun bir yüzey üzerineşişeyi koyun ve biraz soğumasını bekleyin

. Eğer orta 1 L veya daha fazla hazır varsa , hafif bir girdap bunu her 10 ila 20 dakika ver . Sen onundokunmak rahatsız sıcak olmadan yaklaşık 2 saniye boyuncabalona karşı parmakgeri tutabilir zamanorta yeterince soğuduktan olduğunu söylemek mümkün olacaktır . Bu çalışmadan önce yaklaşık 15 ila 20 dakika bekleyin .
13. düz bir yüzey üzerinde bir Petri kabı yerleştirin

. Çanak en kapalı kalmasını yavaşça , bir açıyla kapağı çıkarın. Düztabak kapatınkapağını kaldırmayın .
14çanak yaklaşık yarısı dolana kadarPetri kabı içineşişedenorta dökün

.
15. hemen değiştirin

kapak , bir kenaraplaka taşımak ve istenen tüm plakaları doldurulmuş kadarsonraki geçmek . Plakalar yaklaşık 30 dakika içinde kendi katılaşma tamamlayacak .
16. hemen onları aşılayarak değilse onlar geldi ya da başka bir uygun , steril konteyner hangisteril torbayaPetri kapları yerleştirin

. Nemi korumak içinkonteyner mühür . Istenirseplakaları etiketleyin. Eğertabak saklamak , bunlar yaklaşık 39-40 derece F.
onlayn bir sıcaklıkta tutulmalıdır