. LB suyu lizojeni suyu veya Luria suyu için ortak bir kısaltmasıdır ve bakteri kültür için bir büyüme ortamı olarak kullanılan gibi olur. Bulaboratuvarda sıfırdan yapılabilir , ya da zaman kazanmak için herhangi bir moleküler biyoloji stok tedarikçiden satın alınabilir .
2.
ölçekte kağıt ağırlığında bir yaprak yerleştirin. Kağıdın ağırlığı nihai ağırlık olarak dahil değildir , böylece ölçekte sıfırlama düğmesine basın. 10 g ulaşana kadar , bir seferde trıpton az miktarda ekleyin . Sonramerkezdetrıpton ile yarısındatartın kağıdı katlayın. Tartmak kağıt almak ve dikkatle2 L şişeyeTRYPTONE eklemek için bir huni gibikatlanmış kağıdı kullanın . 5 g maya özü , 10 g NaCl ve 15 g agar tartmak için bu prosedürü takip edin .
3
balonakarıştırma çubuğu bırakın vemanyetik karıştırma plaka üzerindeşişeyi merkezi . 1 litreye kadarçözüm getirmek için yeterli distile su ekleyin .
4.Karıştırma plakası çevirin vekarıştırma çubuğu izle
. Plakakarıştırma çubuğubalonunyüzüne takılıp almadan ılımlı bir hızda hareket sağlamak içindoğru hızda ayarlanmış olmalıdır . Gerekirseayarları yapın . Içinde reaktiflerin tamamı çözününceye kadar çözelti plaka üzerinde oturmak için izin verin.
5'e kadar,karıştırma plaka kapatın ve şişenin üst üzerinde parafilm bir 3 inç kare parça esneme
kapsar ve herhangi bir kirletici veya dökülmesini şişeyi korur. Daha sonra bir alüminyum folyo parçası ile parafilm kapak ve folyo üzerine otoklav bant işaretleme bir parça eklemek .
6
15 psi de 20 dakika boyunca sıvı döngüsünde bir otoklav içindeçözelti yerleştirin sterilize .
7.
otoklavdanşişeyi çıkarın . Çok sıcak olacak . Çözelti oda sıcaklığında veya 65 santigrat derece su banyosundaşişesi koyarak oturmak sağlayarak , çevresinde 55 - santigrat kadar soğumasını bekleyiniz .
8.
Sprey veçalışmalarını aşağı silin bulaşmasını önlemek için yüzde 95 etanol ile yüzey . Buplakalar dokunmadan önce eldiven değiştirmek de iyi bir fikirdir .
9.
Markişaretleme kalemi kullanarak dikey mavi bant ile her plakanınyan ve kapak . Buplakalar LB suyu ve kloramefonikol içeren gösterir .
10konsantrasyon sizi çalışma olacakbakteriler bağlı olarak ,istenilen miktarda ulaşır böyleceçözüme yeterli kloramfenikol antibiyotik ekleyin
. Ortak bir nihai konsantrasyon 100ug/ml olduğunu. Bu konsantrasyon için , 1 ml kloramfenikol stok ( 25mg/ml at) ekleyin . Bir dairesel hareketlerleşişeyi girdap veya emin de karışık yapmak için 1 ila 2 dakika boyuncamıknatıs heyecan plaka geri yerleştirin .
11 etanol ileşişeninağzını silin
bu çözelti ile yarıya kadar doldurulur ve daha sonra ,plakalar halinde solüsyonu dökün. ,Plakalar sertleşmeye bırakın bir kapak ile her plaka kapağı ve kurumasını önlemek için 4 derece santigrat, baş - aşağı saklayabilirsiniz .