proteinlerin ekspresyonu çok basit tanımlanmış bir gen sekansı ile tespit edilmiş olan bir amino asit dizisi tanımlanmış , bir protein üretimidir. Örneğin , bu tespit , ya da bir hücre tarafından üretimi ya da işleme müdahale edebilir proteinin kısımları bertaraf edilebilir , böylece protein üzerindeki bir floresan etiket yerleştirerek - bu dizileri anlama bir araştırmacı çeşitli şekilde bir protein değişiklik sağlar: .
Yöntem ve Protein ifade Analizi Araçları
Protein ifadesi son derece sofistike ve özel teknolojiler ve ELISA, immünoanalizler , kütle spektrometresi gibi prosedürler kullanılarak analiz edilir , ve görüntüleme . Olgularınçoğunluğunda, protein dolaylı olarak saptanır - örneğin, kendisine bağlanan bir antikor kullanılarak ve daha sonra görselleştirmek için ikinci bir tespit sistemi kullanılarak gerçekleştirilir. Temel bir protein algılama tekniği , bir protein , bir agaroz jeli aracılığıyla çalıştırmak ve daha sonra bir zar üzerine aktarılır sırasında Western lekeleme , olmasıdır . Daha sonra, bir antikorun kendisine bağlamak için izin vererek " problanmış " , ve antikorblot üzerindeprotein konumu bir görüntü üretmek için bir gümüş leke gibi bir kimyasal çözelti , ile reaksiyona sokulur. Bu proteinin boyutuna bir göstergesini verir ve çoklu veya tek bir birim olarak mevcut olup olmadığını belirtir. Bir başka sık kullanılan yöntem floresan algılama . Proteine bir floresan parçacık ile etiketlenmiş bir antikorunbağlanma bu mikroskobu ile görüntülenmiştir sağlayacaktır .
Protein İfadesi Analizi Amacı
incelenmesi bir proteinin ifadesi bir araştırmacı, üretilen olduğu bir göstergesini temin etmektedir (yani , kendi ekspresyon paterni ve yerelleştirme ) veya miktarları (yani , kendi doku veya hücresel düzeyleri) . Bu bilgiler , örneğin , idrar proteintespiti bir hasta renal tübüler hastalığı veya diyabetik nefropati gibi böbrek hastalıkları sahip olup olmadığını belirlemek için , tanı patoloji kullanılır. Genetik laboratuvarlarda gen kopyalama deneyleri , genellikle yeniden bileşen ( genetik olarak değiştirilmiş ) proteinleri üretir. Bu sentetik moleküllerin analizi veya gen dizilerinin doğrulamak veya arzu edilir olabilir veya olmayabilir mutasyonlar kontrol önemlidir. Örneğin, aşı genlerin yapay olarak modifiye edilmiş birimler tarafından üretilen proteinlerdir. Bu proteinler, toksik ya da istenmeyen yan etkileri önlemek için , böylece genler, doğru ve arzu edilen bir şekilde değiştirilmiş olan sağlamak için dikkatli bir şekilde analiz edilmelidir. Western Blot
Protein Expression Analiz> western blotting kullanılarak protein ifadesi analizi, bilim adamları gen klonlama ve yeniden birleştirici protein üretimini değerlendirmek için sırayla bir çok rutin laboratuvar işlemdir p. Örneğin, moleküler biyoloji ve genetik mühendisliği , (örneğin, fare ve insan gibi ) farklı bir türden gelen genler birleştirilir ve proteini ifade etme yeteneğine sahip olan bir bakteriyel hücre, içine yerleştirilmiştir . Doğru protein üretilen sağlamak amacıyla , kendi ekspresyon western blotting ile analiz edilmelidir. Western blot da deli dana hastalığı ve HIV teşhis, tıbbi patoloji kullanılır .
Akış Sitometrisi ile
Protein İfade Analizi sitometri ile lekeli hücrelerin gerektirir yüzeyinde eksprese edilen bir protein ya da içinde , bir hücreye bağlanan floresan antikor. Bu , belirli bir hücre grubu özgü ve hücre sinyal , iletişim ile ilgili moleküller ( sitokinler) bulmak için farmasötik araştırmalarda kullanılır. Normal hücre fizyolojisi ve fonksiyonu üzerinde ilaçlarınetkisi , ilaç geliştirme ve klinik çalışmalar sırasında izlenebilir ve böylece bu önemli.