TPA saflaştırılması Bu protokol, fibrinoliz çalışmalarında kullanılan , tümör oluşumu ile ilgili olarak adlandırılan fibrin pıhtılaşmasının ürün, kırılma süreci. Uygulayıcılar , pH 4.2 de , potasyum asetat tampon maddesi ile aseton ile kurutulmuş domuz böbrek TPA ekstrakte edin. Sonra, hücre çökelti oluşumu için amonyum sülfat ekleyin. Bu n-butil- sefaroz sonra kromatografya üzerinde analiz edilirörnekleri , ekleyin. Concanavalin A, aynı zamanda ilave edilir ve farklı proteinler ayrı chromatograph.y gerçekleştirilir. Çin Hamsteri Yumurtalık ve E. coli hücrelerinden TPA
saflaştırma
Protein saflığı olan bir biyolojik deneylerinbaşarısında önemli bir faktördür . Saflaştırılmış TPA böylece zaman ve nedeniyle kötü saflaştırılmış çözeltisinedeney tehlikeye riskini ortadan kaldırırken , aynı zamanda ticari olarak temin edilebilir . Bu protokol, memeli ve bakteri hücrelerinde TPAarıtma işlemleri içerir. Teknisyenler , hücre örnekleri çökelti onları süzün ve afinite ve jel kromatografisi analizi gerçekleştirmek . Daha sonra , onlar önce ticari üretimesonuçları , analiz ve karşılaştırma . E. Aktif İnsan TPA coli
Temizlenmiş hücre lizatlan ilave edilir
Expression lisin - Sepharose kolonu, bir kromatografya içinde analiz edilmiş ve sodyum klorür çözeltisi ile yıkanmıştır. Başka bir örnek, çok yüksek bir afinite ile bağlanan TPA proteinleri içeren ikinci bir kromatografi sütunu üzerine yüklenir. Ikinci sütundan bir örnek, çinko - Sepharose eden bir çözelti ile karıştırılır. Oluşan proteinDergiye göre, fazla yüzde 90 saflık gösterir " Applied and Environmental Microbiology . "