ELISA'nın HIV testi için nasıl kullanıldığına dair bir genel bakış:
Antijen kaplama:Mikrotitre plakaları, zarf glikoproteini (gp120, gp41) veya diğer viral bileşenler gibi HIV proteinlerinden türetilen antijenlerle kaplanır.
Numune ekleme:Seyreltilmiş test serumu veya plazma numuneleri, antijen kaplı plakanın kuyucuklarına eklenir.
Antikor-antijen reaksiyonu:Örnekte HIV antikorları mevcutsa, bunlar plaka üzerinde kaplanmış ilgili antijenlere bağlanacaktır. Bu bir antijen-antikor kompleksi oluşturur.
Yıkama adımı:Fazla numune bileşenleri gibi bağlanmamış maddeler yıkanarak uzaklaştırılır.
Enzime bağlı ikincil antikor:Yakalanan HIV antikorlarına özgü, enzime bağlı ikincil bir antikor eklenir. Bu antikor, yaban turpu peroksidaz (HRP) gibi bir enzime konjuge edilir.
Substrat Ekleme:Enzime özgü bir substrat eklenir. HRP'nin varlığında kolorimetrik veya floresan bir reaksiyon meydana gelir.
Renk gelişimi:Belirli bir inkübasyon süresinden sonra substrat, bir ELISA okuyucusu kullanılarak tespit edilebilecek ve miktarı belirlenebilecek renkli veya floresan bir ürüne dönüştürülür.
Sonuçların yorumlanması:Örnekte yakalanan HIV antikorlarının miktarını değerlendirmek için optik yoğunluk (OD) veya floresans yoğunluğu ölçülür. Pozitif bir sonuç, HIV antikorlarının varlığını gösterir ve potansiyel HIV enfeksiyonuna işaret eder. Olumlu ve olumsuz sonuçlar arasında ayrım yapmak için bir kesme değeri tanımlanır.
ELISA, HIV antikorlarını tespit etmek için nispeten basit, doğru ve hassas bir yöntem sağladığından HIV taraması ve tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, ELISA sonuçlarının bazen tanının doğruluğunu sağlamak için Western blot veya viral yük testi gibi ek testlerle daha fazla onay gerektirebileceği unutulmamalıdır.