kelimesi "parçalama " bir Yunan kök anlamına gelen " gevşetmek için . " Hücre parçalama olarak, birlikte hücre zarı tutan kuvvetleri o yırtılmasına neden bozulur . Hücrenin içeriği daha sonra , ilgi konusu proteinin de dahil olmak üzere , çevreleyen çözelti , salınır. Genellikle bu lizis tamponu kimyasal bir çözeltisinin eklenmesi ile yapılır.
Liziz Tamponu hazırlanması hücre tipi , protein ve uygulamaya bağlıdır liziz tamponu seçimi
.
farklı lisis çözümler bir sayısız ticari olarak temin edilebilir , ya da genel tarifleri ortak kimyasallardan lizis tamponu hazırlamak için de kullanılabilir . Kullanmak için en iyi tamponu kullanılan hücre tipi, izole edilecek olan protein ve nihai uygulamaya bağlı olarak değişir , ancak genel olarak, lizis çözeltisi hücre çözünen bir deterjan molekülü (genellikle NP- 40 ya da Triton- X) içeren membran , bir kez hücrenin koruma ortamından serbest zarar görmesiniengellemek için protein tampon maddeleri, kenetleme maddeleri ve proteaz inhibitörleri ile birlikte .
Lysis
koşullar altında gerçekleştirme liziz buz soğukluğunda durumlar çıkar proteine hasar görmesini önler.
Liziz tamponu genellikle buz soğukluğunda kullanılır ve yokedici yöntem soğuk koşullar altında devam etmesine izin verilir . Çözelti yavaşça hücreler ve parçalama ürünleri eşit bir dağılım teşvik etmek sallandı . Yaklaşık 5-10 dakika sonra, lizis çözeltisi genellikle daha fazla aktivitesi önlenmesi için nötralize edilir. Bu önlemler proteine zararı azaltmak ve daha sonra kaldırılacak gerekecektir üretilen yabancı enkaz miktarını azaltır.
Diğer Lysis Yöntemleri
Mekanik kuvvet de hücreleri lize etmek için kullanılabilir . Kimyasal liziznazik ve en yaygın olarak kullanılan , ancak
hücrelerin yok edilmesi için daha sert , mekanik yöntemler , bazı durumlarda kullanılabilir. Bunlar, ezme süreçtir sonication , tekrarlanan donma-erime döngülerinden ve homojenleştirilerek içerir. Özel durum içinen uygun yöntemi bulmak içinteknik literatürü danışın .